正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔ShameikMoore配音）意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，随后身体发生奇特的变化。偶然机缘，他目睹了蜘蛛侠（克里斯·派恩ChrisPine配音）和犯罪头目金并（列维·施瑞博尔LievSchreiber配音）的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙，蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久，来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克（杰克·约翰逊JakeM.Johnson配音）出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋，并帮助这个帕克返回自己的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。他们合力与恶势力展开斗争……
演员：韦恩·杜瓦尔 杰曼·翰苏 基里安·墨菲 艾米莉·布朗特 诺亚·尤佩 约翰·卡拉辛斯基 米利森特·西蒙兹 斯科特·麦克纳里 阿什利·戴克 奥基里特·奥诺多瓦 卡德罗莎·奥娜·卡罗尔 Barbara Singer 罗伯特·A·科尔迪科特 丽兹·卡梅隆 塞拉斯·佩雷拉-奥尔森 克丽斯塔莉丝·博尼拉 扎卡里·戈林格 迈克尔·艾伦·科莱特 布莱克·德隆 加里·桑当 克兹托夫·克里斯·马杜拉 迪安·伍德沃德 大卫·伦迪 乔·卡佩利 查德·科尔比 艾丽丝·索菲·马尔尤科娃
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演员：杰瑞·费拉拉 连姆·尼森 浅野忠信 拉米·马雷克 蕾哈娜 路易斯·隆巴迪 亚历山大·斯卡斯加德 哈米什·林克莱特 亚当·戈德利 杰西·普莱蒙 乔什·平茨 布鲁克琳·黛克 泰勒·克奇 拉吉·K.波斯 约翰·贝尔 彼特·麦尼科 约翰·图伊
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